细胞培养中常见的生物污染包括细菌污染、霉菌污染、支原体污染、黑点污染、真菌污染和原生动物污染。这些污染在细胞培养中的特点及相应的解决办法如下:
1.细菌污染
细菌在普通倒置显微镜下呈黑色和细砂状。根据gan染菌的种类不同,可能会呈现不同的形状,培养液一般会变得浑浊、黄色,对细胞生长有明显影响。
解决方法:仔细检查器具的灭菌情况,确保通风时间和高压灭菌器的压力是否足够。重要的是,与培养基接触的移液管等物品如果被污染两次,则可能会导致储存溶液也受到污染。所以一定要注意!下次使用前要检查培养基的浑浊度。一般流程:细胞收集-PI-AnnexinV标记-流式细胞仪检测。此外,建议在培养基中添加抗生su。
Q:中的沉淀物对细胞培养有什么影响?
A:(1)细胞生长,我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养,我们的客户以及其它生产商也证明了这一点。
(2)过滤,如果中出现大量的沉淀物,将很难过滤。一般说来,因为在生产工序中已经过 100nm 或者 40nm 的过滤处理,并且经过了严格的无菌检测,因此不推荐再过滤用于细胞培养 的。然后去固定液,加适量GIMSA应用染色液染10~30分钟,然后用流水缓慢洗去染色液,空气干燥。在实验室中没有必要再过滤处理,在大规模的细胞培养中往往将直接加到培养基中一起 过滤。
(3)污染,磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起。研究者可能会在中观察到一些絮状的 沉淀,因此就会比较警觉的去做无菌试验,将放在培养箱中培养几天,结果可能会观察到更多的絮状 沉淀,因此就断定被污染了。并且当研究者将样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可 以运动的小黑点,因此就更加确认是被污染了。于是,研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商 确认,但终确定没有被污染而只是沉淀。细胞实验部分设备图片公司目前拥有多项专利产品及技术,其中发明专利两项,软件著作权八项,实用新型专利三项,商标两件。为了避免这些问题的发生,我们建议不要直接将放在 培养箱中培养观察是否有菌,而是将加到琼脂板上进行培养以观察是否有细菌生长。另外,也可以进 行革兰氏染色,在油镜下观察,以确认是否有污染。
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