动物模型的设计原则
可靠性
的动物模型来应该力求可靠地反映人类疾病,即可特异地、可靠地反映某种疾病或某种机能、代谢、结构变化,应具备该种疾病的主要症状和体征,经化验或 X照片、心电图、病理切片等证实。出现大量闭锁luan泡,由于正常luan泡数减少luan巢体积缩小的。若易自发地出现某些相应病变的动物,就不应加以选用,易产生与疾病相混淆的疾病者也不宜选用。例如铅可用大白鼠做模型,但有缺点,因为它本身容易患动物地方性及进行性,后者容易铅所致的相混淆,不易确定该是铅所致还是它本身的疾病所致。用蒙古沙土鼠就比较容易确定,因为一般只有铅才会使它出现相应的变。
实验动物的分组
(一)分组的原则:进行动物实验时,经常需要将选择好的实验动物按研究的需要分成若干组。同时应该一般饲养员较熟悉而便于饲养的动物作研究对象,这样,就无需特殊的饲养设施和转运条件,经济上和技术上容易得到保证。动物分组应按随机分配的原则,使每只动物都有同等机会被分配到各个实验组与对照组中去,以避免各组之间的差别,影响实验结果,特别是进行准确的统计检验,必须在随机分组的基础上进行。
每组动物数量应按实验周期长短、实验类型及统计学要求而定。如果是慢性实验或需要定期处死动物进行检验的实验,就要求选较多的动物,以补足动物自然和认为处死所丧失的数量,确保实验结束时有合乎统计学要求的动物数量存在。
(二)建立对照组:分组时应建立对照组。1.自身对照组:是指实验数据而言。造模后14d,行闪光视觉诱发电位检测,处死大鼠取眼球,观察各组大鼠视wang膜和视神经的病理形态,行视wang膜神经节细胞计数。实验动物本身在实验处理前、后两个阶段的各项相关数据就分别是对照组和实验组的实验结果,此法可排除生物间的个体差异。2.平行对照组:有正对照组和负对照组两种。给实验组动物某种处理,而给正对照组用同样方法进行处理,但并不采用实验所要求的或手段,负对照组则不给任何处理。3.具体分组时,应避免人为因素, 随机把所有的动物进行编号,然后令其双数为A组(实验组),单数为B组(对照组)即可或反之。如果要分若干个组时,应该用随机数字表示进行完全随机分组。
实验动物如何选择?这个问题对于药理和实验动物的朋友来说,不是难事。但对于需要做动物实验的其它的朋友来说,有时候会感到茫然。或者没有自己的思考,照抄别人的做法。
对于这一部分站友,我们不可能要求去系统学习《医学实验动物学》,但我们可以常备一本在身边。本模型采用离乳大鼠是由于幼鼠在发育期阶段对dan碱的需求量较大,因dan碱缺乏造成对机体伤害的敏感性自然比成年动物更强。在需要用的时候翻一翻,将会使你豁然开朗。因为书中比较详细地介绍了常用实验动物的解剖生理、生物学习性等等,主要的是它为你选择什么样的实验动物提供了重要的参考。
因此,系统学习或者零星地翻阅《医学实验动物学》是保证合理选用实验动物的基础之一。再者就是要参考大量文献。
实验动物大、小鼠的采血方法
1、动物实验中剪尾采血:需血量少时可用此方法。将动物固定,显露尾部,将尾尘剪去约5mm,从尾根部向尾端部,血即从断端流出。(2)模型特点大鼠在造模4d后开始出现一系列的渐进理变化,肺功能检查模型大鼠第4日时的胸腔气体容积(TGV)值增加65%,而到第8日就不再变化,而造模前后大鼠气道阻力(Raw)值则变化无显著性差异。若用二棉球涂擦尾部或事先将鼠尾浸在45℃水中数分钟,使尾部血管充盈,可采到较多的血,但注意二可致溶血。也可用锋利刀片割破尾动脉或尾静脉,让血液自行流出,采血后,消毒,止血。如将动物取血量可更多些。小鼠每次采血约0.1ml,大鼠约0.4 ml。为了多次反复取血应尽量从鼠尾末端开始。
2、动物实验中摘眼球采血:此法常用于鼠类大量采血。实验方法Step1:用高脂肪高糖的膳食饲喂小鼠,诱导出胰岛素,持续约4-6周。用左手固定动物,压迫眼球,尽量使眼球突出,右手用无钩弯镊子或弯止血钳迅速摘除眼球,立即将鼠倒置,头朝下,眼眶内很快流出血液。一般只适用于一次采血。大部动物采血后可以存活,可采另一侧眼球取血。
大鼠后眼框静脉丛取血方法
4、动物实验中颈静脉或颈动脉采血:将鼠,剪去一侧颈部外侧被毛,作颈静脉或颈动脉分离手术,用即可抽出所需血量。也可插入导管,反复采血。
5、断头采血:操作者左手拇指和食指握住鼠颈部,头朝下,用利剪在头颈间1/2处迅速剪动物头部,提起动物,血液即可流入准备好的容器中。
6、心脏采血:将动物,使其仰位固定,剪去胸前区毛,消毒皮肤,在左侧第3—4肋间选择心博强处穿刺,血液借心脏跳动的力量进入。亦可在动物后,切开动物胸腔,直视心脏内抽血或剪破心脏,直接用、吸管等吸血。
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