病理实验外包,石蜡组织脱水注意事项1.脱水必须在有盖的玻璃品中进行,防止吸收空气中的水分。2.在更换高一级的脱水剂时,好不要移动材料以免损坏,可用吸管吸出器皿中的脱水剂,再用吸水吸尽器皿内剩余液,然后于皿中加入高一级脱水剂。3.在低浓度酒精中,每级停留不宜太长,否则易使组织变软,助长材料的解体。4.在高浓度或纯酒精中,每级停留的时间也不宜太长,否则会使组织变脆,影响切片。固蓝染色(FASTBLUE)又称LFB染色,属铜酚-箐燃料,在乙醇溶液中可以与髓鞘磷脂特异性结合,一般染脑、脊髓、外周神经。5.如需过夜,应停留在70%酒精中。6.脱水必须,否则不易透明,甚至使透明剂内出现白色混浊现象。
病理实验外包,南京英瀚斯可开展冰冻切片荧光染色1.冰冻切片室温晾干15 min,可用含10%正常山羊的PBS室温封闭切片1小时(此步可不洗)。2.滴加适当比例稀释的一抗或一抗工作液(的量视组织大小而定,原则是可以均匀覆盖组织面,且保证整个过程中不会使组织干涸)。3.将切片放在加了PBS的组化湿盒,室温孵育2小时或4℃过夜。4.第二天先将湿盒放到37℃回温1 h,然后吸取片上的一抗进行回收,将切片插入到小染缸PBS冲洗。5.滴加用PBS稀释好的二抗(避光)置于分子杂交箱中37℃孵育1小时。回收二抗,切片置于染缸内,PBS洗5 min×3次。根据团队发展需要,医学科研外包业务自2020年以“英瀚斯”品牌独立运营。6.滴加DAPI工作液染核,室温10~20 min(工作浓度0.1%染色15 min)。7.回收DAPI,滴加5-10 μl 抗荧光衰减封或中性树胶,用处理干净的盖玻片封片,即可到荧光显微镜或者共聚焦显微镜下。8.做好的片放在切片盒内,置于4℃冰箱,可保存一周左右。
病理实验外包,病理染色常见染色介绍甲蓝染色:甲蓝(Toloniumchloride),是一种化合物,分子式为C28H20N2O10S2·2Na,分子量为656.62,甲蓝深绿色粉末,具古铜色光泽,易溶于水,呈蓝紫色溶液。微溶于醇呈蓝色,极微溶于,几乎不溶于醚。商品大部分为氯化锌复盐。主要用于氧化还原指示剂。用于检查缺陷和损伤部分,组织化学中用于测定脱氧核糖核酸和诊断。甲蓝是常用的人工合成染料的一种,属于醌染料类,这类染料一般含有两个发色团,一个是胺基,一个是醌型苯环,来构成色原显色。TTC可以被活细bao中的具有还原活性的酶(好像主要是琥珀酸脱氢酶)还原生成粉红色的还原产物,所以活组zhi部分呈现粉红色,而si亡的细胞的还原酶的活力已经消失,因此TTC不能被还原,所以si亡的组织呈现白色。染料除有发色团外,还要有能使色原对组织及其他被染物产生亲和力的原子团即助色。助色团能促使染料产生电离成盐类,帮助发色团对组织产生染色力,使切片上的组织细胞着色。甲蓝不仅含有两个发色团,还含有两个助色团,为碱性染料,甲蓝中的阳离子有染色作用,组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。基质对甲蓝的异染性,是因为基质的主要成分是黏蛋白、多糖物质,而酸性硫酸根与嗜碱性染料有亲和力。
病理实验外包,病理染色黑色素染色
1.Masson-Fontana黑色素银浸染色法
黑色:黑色素及嗜银细胞颗粒
红色:胶原纤维
浅黄色:背景
2.Lillie亚铁染色法
暗绿色:黑色素
浅绿或不着色:背景
黄色:肌纤维和背景
含铁血黄素染色
Perls blue(普鲁士蓝)反应显示三价铁
蓝色:含铁血黄素
浅红色:其他组织
胆色素染色
三氯醋酸染色法
绿色:胆色素
红色和黄色:其他南京英瀚斯,的病理染色实验服务平台。